克隆的主要载体有哪些类型?

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/05/09 13:45:26

克隆的主要载体有哪些类型?
克隆的主要载体有哪些类型?

克隆的主要载体有哪些类型?
载体（Vector）是把外源DNA（目的基因）导入宿主细胞,使之传代、扩增、表达的工具.载体有质粒（plasmid）、噬菌体、单链丝状噬菌体和粘性末端质粒（粘粒）、病毒等.载体具有能自我复制；有可选择的,便于筛选、鉴定的遗传标记；有供外源DNA插入的位点；本身体积小等特征.
质粒存在于多种细菌,是染色体（核）以外的独立遗传因子,由双链环状DNA组成,几乎完全裸露,很少有蛋白质结合.质粒有严紧型和松弛型之分.严紧型由DNA多聚酶Ⅲ复制,一个细胞可复制1-5个质粒.而松弛型由DNA多聚酶Ⅰ复制,一个细胞可复制30-50个质粒,如果用氯霉素可阻止蛋白质合成,使质粒有效利用原料,复制更多的质粒.质粒经过改造品种繁多,常用的有pBR322、pUC系列等.这些质粒都含有多个基本基因,如复制起动区（复制原点Ori）,便于复制扩增；抗抗生素标记（抗氨芐青霉素Apr、抗四环素Tcr等）或大肠埃希菌部分乳糖操纵子（E.coli LacZ）等,便于基因重组体的筛选；基因发动子（乳糖操纵子Lac、色氨酸操纵子Trp等）和转录终止序列,便于插入的外源基因转录、翻译表达.质粒上还有许多限制性内切酶的切点,即基因插入位点,又叫基因重组位点,基因克隆位点.
常用噬菌体载体有单链噬菌体M13系统；双链噬菌体系统.噬菌体应和相应的宿主细胞配合使用.以上载体各有特点,便于选择,灵活应用.

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