给定一个cDNA序列,如何表达,纯化到蛋白质?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/09 11:33:09
给定一个cDNA序列,如何表达,纯化到蛋白质?

给定一个cDNA序列,如何表达,纯化到蛋白质?
给定一个cDNA序列,如何表达,纯化到蛋白质?

给定一个cDNA序列,如何表达,纯化到蛋白质?
首先根据蛋白性质及实验要求选择表达载体,比如是原核还是真核表达,是否加标签,是否控制表达位置及强度等.
然后根据载体和目的蛋白设计引物,要考虑加酶切位点,保护碱基等.
其次选择合适组织提取RNA,RT-PCR,酶切,克隆,鉴定,扩增质粒,转入宿主,诱导表达,纯化,鉴定.

PCR,然后产物连接到pMD-T19上,注入到大肠杆菌中扩增,提取质粒,再通过酶切,连接到表达载体中,转入到表达菌种中,诱导表达,提取总蛋白,SDS检测,OK

给定一个cDNA序列,如何表达,纯化到蛋白质? 目的基因序列已知,如何克隆其cDNA? 如何由EST序列从cDNA文库中获得全长cDNA? 如何查找cDNA序列 如何把基因序列转化为蛋白序列我知道一个基因的dna序列,请问如何转化为这个基因所表达的蛋白序列 如何从一个表达基因文库中克隆某个已纯化的蛋白质基因 如何判断一条给定的DNA序列是否含基因? ncbi搜索到的mRNA序列是cDNA?是反义or正义?为什么mRNA序列中是T而不是U cDNA是gDNA中外显子部分的序列拼到一起吗? 说明如何利用NCBI查找EGF的mRNA,cDNA及蛋白质序列? 如何从真核生物cDNA文库中获得未知序列的目的基因 已知一个cDNA3'端部分序列,设计实验得到该基因的全部cDNA 以一个基因为例,设计至少两种使cDNA序列分离的方法简述其过程 可溶性表达的蛋白如何纯化?纯化后如何除咪唑? pgex连接某种放线菌一段基因序列后,如何纯化较好若考虑pgex特征应采取何种纯化方式? 我现在纯化了一个酵母的蛋白,经过分析得知了这个蛋白的很多的氨基酸片段序列,怎么才能得这个蛋白质的基有的文献上说构建cDNA文库,还有别的方法吗?求高手赐教,请把相关的参考文献也告 查出基因AT1G58122和AT3G05030的基因组序列及cDNA序列,核酸序列分析,表达Pr序列及分析.------基因的生物信息学分析研究报告包括以下六个部分的内容:一、------基因的基因组序列(包括启动子部 如何判断获得的某一真核生物cDNA序列是否为全长序列不要告诉我blast哦 主要弄清楚真核生物mRNA序列的基本特征