GC含量超过60%的引物可用吗

GC含量超过60%的引物可用吗 引物足够长但GC含量不足怎么办? GC含量太高会怎么样引物GC含量太高会对pcr产生什么影响啊? 引物的长度包括酶切位点在内么?计算Tm值以及计算GC含量时用算酶切位点的么? 当引物中GC含量不足时是否可以补加GC? PCR扩增基因设计引物时,用Primer5检测上游引物和下游引物的互补性,显示free energy= 1.50 Kcal/mol这样的引物可用吗? 追问引物设计第一次PCR的产物胶回收后用纯化吗,还是可以直接当做底物?目的基因3‘端GC含量太高,导致上下游引物Tm值差别太大,这样可以用吗?是不是内引物条件可以适当放宽?还有,我用的是p PCR引物GC含量过低时候,如何调整PCR体系? PCR 引物设计,在扩增一个基因片段,1200bp左右,编码区1000个bp左右.由于上游引物GC含量高,我想分两段扩增.设计一个引物,下游设计一个引物,上下游引物间想穿插（包含一定共同片段）,这样成吗. 要扩增3000左右的目的片段,但是设计的上下游引物的GC含量差异很大,如何是好?急求……即起始密码子之后和终止密码子之前的部分,GC差异很大…… 带酶切位点的引物设计问题带酶切位点的引物设计时计算Tm值,退火温度及GC含量时是否要把酶切位点和保护碱基计算在内?我觉得不用,因为酶切位点可以不用跟模板结合, pcr条件设定：我要p一个2000+bp的片段 pcr条件怎样设我的两个引物都是33bp GC含量为43% p过两次 都是引物二聚体 pcr 一段2000多bp的基因 引物设计时 条件怎么设 包括引物长度 gc含量等 因为我用软件设计时总是设不出来 可以改哪些参数呢 PCR扩增gc含量很高的序列我要克隆一个gc含量很高（75％）的基因,然后在真核细胞表达,因为想要整个orf,但是终止子附近的gc 含量很高（大于80％）,但还要把终止子突变掉,所以引物还必须在终 如何把某特定基因引物的退火温度设置到 36度是在最有引物的基础上添加GC吗, 引物的序列怎样定知道mirRNA的序列,利用PCR检测其含量是需要引物,这个引物可以直接写出来吗? 在DGGE实验中,胶回收后要测序前的PCR扩增时引物必须为不带GC夹子的吗?我用带GC夹子在DGGE实验中，胶回收后要测序前的PCR扩增时引物必须为不带GC夹子的吗？我用带GC夹子的扩增了，有三个条 PCR扩增退火温度确定引物F:SIZE:20 TM56.9 %GC:55引物R：size：29 TM67 %GC:55根据TM=4*（G+C）+2(A+T)-5它的退火温度是多少?本人小菜鸟一枚,请教高手,主要是不懂从订单上怎么确定G+C及A+T的含量?我知道有