弱弱的问个问题,现在有三十二对引物,浓度为100μM,做10μl的PCR反应体系,上下游引物各需5pmol,我该怎怎么稀释好呢?把两种引物合并在一起用,操作简单一点的,毕竟有三十二对,

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/29 22:34:23
弱弱的问个问题,现在有三十二对引物,浓度为100μM,做10μl的PCR反应体系,上下游引物各需5pmol,我该怎怎么稀释好呢?把两种引物合并在一起用,操作简单一点的,毕竟有三十二对,

弱弱的问个问题,现在有三十二对引物,浓度为100μM,做10μl的PCR反应体系,上下游引物各需5pmol,我该怎怎么稀释好呢?把两种引物合并在一起用,操作简单一点的,毕竟有三十二对,
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以下基于我认为开始的100μM是每一个引物的浓度.
你把每条引物稀释10倍到10μM,然后把上下游引物1:1混合在一起,这样上下游引物最终为5μM.
PCR的时候10μl的体系里面加入1μl之前混合好的引物对溶液即可
这时对于每一条引物最终为5μM x 1μl 就是 (5x10^-6 mol/L) x (1x10^-6L)=5x10^-12mol 即为5pmol

很简单,看你每对引物最终需要用多少次。针对10次而言,每对引物各取母液(浓度100μM)0.5μl加入到9μl无菌去离子水中,每个PCR反应加1μl混合好的引物。

弱弱的问个问题,现在有三十二对引物,浓度为100μM,做10μl的PCR反应体系,上下游引物各需5pmol,我该怎怎么稀释好呢?把两种引物合并在一起用,操作简单一点的,毕竟有三十二对, ssr引物筛选我是做分子标记的,现在遇到一些问题?1、根据引物报告单上的退火温度,上游和下游温度不一样怎么选择?2、我有600对引物,3个亲本,现在要筛一遍,用96孔的PCR板P的时候,每一对退火 如何在NCBI上寻找要扩增的序列?我要用PRIMER 设计引物.位点是CYP2C19*2,是一个SNP的位点.我在NCBI里查到了这个基因的信息.现在我有3个问题如下:1.引物设计的对象是FASTA中的序列还是GENEBANK中的 我现在有96份植物材料,要从100个随机引物中筛选出合适的引物,那请问实验操作时,每个引物对96份标本材料都进行pcr电泳,那是不是就要做96*100=9600个实验,是这样进行筛选引物的么?求具体的讲 什么是上游引物和下游引物?麻烦再问一下:上下游引物是不是多用在多对引物的扩增中???谢谢 关于ISSR引物我现在打算做ISSR扩增,我有100个样品,但是不知道该购买多少引物,以及该买哪些序列的引物,希望大家能帮帮忙给个意见,我的100个是我提的DNA样品,不是引物。我还没买引物,你的 PCR扩增的正反向引物的长度必须一致吗?在别人的文章里看到两对引物正好是我所需要的,但长度不同,正向引物20个碱基,反向引物是19个,这样的引物可以用吗?对实验有什么影响吗? 高中生物简单问题PCR技术中引物用了31个,DNA是双链为什么引物有奇数个 PCR,将引物原液做琼脂糖凝胶电泳,一般点样用多大量还有我的引物有22对碱基,要跑胶的话,琼脂糖凝胶应作成百分之几的?我看资料上讲检验正反引物的浓度,用引物原液做琼脂糖凝胶电泳 我在做overlap PCR,两个片段一条736bp,一条255bp,20个重叠碱基,四个引物的TM值都是59度,两条都P出来了现在加入两端的引物,就是扩不出来1000的条带,这20重叠有13个是CG对,我不知道是不是退火温度的 引物设计问题我是个菜鸟,想问一下,如果给你一段DNA序列,如ggattcgtagctagtatttgcaggtagcttgctgaggcttaaaagctagctacattcggtagcatcatgctattagcgatcaaatcgcccatcggatcactacacgacgatcggcgattatcgatcatcgttactacgatcgacttcagcgtacatctactagcgatgctat 引物发夹结构我用的是文章里面的引物,与NCBI里面的序列比对,符合度100%,279bp大小,但是就是扩增不出来目的片段,只有引物二聚体,现在我想比对下,看看我用的引物是不是有严重的发夹结构,请 三十二的因数有哪些 希特勒本人对拿破仑有什么看法历史上有没有记载?我不是问他们俩个谁谁弱.拜托不要讨论那方面的问题 就是一个宽三格,长四格的长方形,问有多少个正方形在里面,A.三十 B.三十四 C.二十八 D.三十二 就是一个宽三格,长四格的长方形,问有多少个正方形在里面,A .三十 B.三十四 C.二十八 D.三十二 弱弱的问一个问题,现在几点啦 启动子和引物有什么区别?是不是以前的生物化学中成为启动子,现在改为引物了?