pcr 25微升 体系的各种组分具体是怎么加的?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/29 16:33:06
pcr 25微升 体系的各种组分具体是怎么加的?

pcr 25微升 体系的各种组分具体是怎么加的?
pcr 25微升 体系的各种组分具体是怎么加的?

pcr 25微升 体系的各种组分具体是怎么加的?
10×buffer 2.5ul;
MgSO4,1.5ul;
Taq 1ul;
10uM上下游引物 各1ul
模板 1ul
补水至25
MgSO4是可以调整的,taq得根据你的单位浓度,引物也要看浓度一般终浓度至0.1-1uM,模板也需视你模板质量和浓度调整.

为啥不是20或者40,50的。。。
mix 12.5
模板 cDNA的话3.5 提的质粒的话1.5
引物各1
加水补到25

如果是荧光PCR 25UL体系的话 这个是需要调试的 至少据我了解DNA这块有方面的要求 一般为40UL 不是按比率减少那么简单的

pcr 25微升 体系的各种组分具体是怎么加的? PCR扩增时,25微升体系一般加引物多少? 20微升pcr反应体系各种反应物分别应该加多少 PCR产物的电泳条带不够亮,为何?如何优化PCR反应体系我用的25微升的反应体系 25微升PCR体系中,两种引物分别加0.5微升,那么所添加的引物的浓度是多少?几摩尔每升?不问终浓度,问的是加入体系之前那0.5微升的引物其浓度几何? PCR 怎样稀释做50微升体系的PCR使用的引物浓度是多少?怎样稀释? pcr反应体系中引物浓度20uM指的是什么,还有20微升体系怎么换算成50微升体系呢, mtDNA进行pcr扩增 25微升体系的电泳结果全部都出想要的一条亮带 但是做了50微升体系的之后跑电泳 许多不出条带 要不就是有拖带 这种情况是怎么回事 酶切反应体系中是10微升的好还是20微升的好? 菌液直接PCR我的pcr体系是50微升的,预变性时间5分钟,模板7微升,我接种单菌落到增菌液,以往都是煮沸了制模板然后pcr鉴定是不是我要的细菌,听说可以用菌液直接pcr,不知道预变性时间该改为多 请教高手关于移液枪的使用现在跑PCR,25微升体系,有两把枪,一把20ul的,一把100ul的,先把体系混合好了再分装入每个PCR管,最后加酶.现在有个问题是,是用20ul的枪调成25ul去加样,还是用100ul的枪调 pcr反应体系包括哪几个组分 请问我的电泳图跑成这样,是为什么?我的模板用的是第一次PCR的产物,体系总共是60微升,模板2微我的第一次PCR用的是质粒DNA 而且产物条带还行 PCR反应体系中dNTP的浓度怎么算?我的反应总体积20微升,其中加1.0微升dNTP,装有dNTP管上写的10mM,1mL. 什么是25微升PCR反应体系?是不是还有其他体系呢,我不太懂这个,只是用到了而已,这个体系有什么意义,怎样选择呢,希望哪位朋友前前后后给我将明白一点, 如何增加PCR产物?我得PCR扩增循环数是30个,扩增体系是15微升,其中NTP的浓度是1.5,引物和酶都是1,模板是1.2,镁离子的浓度是1.0.能扩出目的条带,但是琼脂糖电泳条带不是很亮,即目的条带的量不 【跪求】我的PCR体系应该怎么设定?退火温度?我做一种真菌的pcr,引物序列左:aatcgacccgtttccgcctt, 右:gttagattgaccgcgattcc,生工合成单给的退火温度分别是59.85和57.8我的25微升体 SacI和BamHI 50微升的体系怎么配制?