细胞凋亡的检测及优缺点

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/03/29 16:40:02
细胞凋亡的检测及优缺点

细胞凋亡的检测及优缺点
细胞凋亡的检测及优缺点

细胞凋亡的检测及优缺点
方法很多,给你推荐一个比较新的,单细胞凝胶电泳,也叫彗星实验
优点是该法检测具有高灵敏性,研究的细胞不需处于有丝分裂期.同时,这种技术只需要少量细胞.
原理:
当各种内源性和外源性DNA损伤因子诱发细胞DNA链断裂时,其超螺旋结构受到破坏,在细胞裂解液作用下,细胞膜、核膜等膜结构受到破坏,细胞内的蛋白质、RNA以及其他成分均扩散到细胞裂解液中,而核DNA由于分子量太大只能留在原位.在中性条件下,DNA片段可进入凝胶发生迁移,而在碱性电解质的作用下,DNA发生解螺旋,损伤的DNA断链及片段被释放出来.由于这些DNA的分子量小且碱变性为单链,所以在电泳过程中带负电荷的DNA会离开核DNA 向正极迁移形成“彗星”状图像,而未受损伤的DNA部分保持球形.DNA受损越严重,产生的断链和断片越多,长度也越小,在相同的电泳条件下迁移的DNA量就愈多,迁移的距离就愈长.