农杆菌质粒DNA常用的提取方法?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/25 20:06:41
农杆菌质粒DNA常用的提取方法?

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农杆菌质粒DNA常用的提取方法?
一、从在含20 mg/l Kanamycin和15 mg/l Gentamycin 5-8 ml的液体LB培养基中接种Agrobacterium细胞,然后在28℃、200-220 rpm培养24 h.然后进行质粒提取. 二、新鲜配制Sol II溶液(880 l H2O, 100 l SDS 10%, 20 l 10 N NaOH),及包含 4 mg/ml溶菌酶Lysozyme 的200 l Sol I (P1)溶液. 三、对培养一昼夜的的Falcon试管在3600 rpm速度下进行离心12 min,丢弃上清. 四、用200 l 5 M NaCl重悬农杆菌细胞,利用涡旋将农杆菌细胞混匀.转移到Eppendorf管中. 生物帮有相关问题的详细介绍,分子生物学洗涤剂 http://product.bio1000.com/101184/