为什么我们进行16S rDNA测序时,要将扩增产物导入的细菌中,而不直接对纯化后的PCR产物直接测序?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/03/28 21:18:49
为什么我们进行16S rDNA测序时,要将扩增产物导入的细菌中,而不直接对纯化后的PCR产物直接测序?

为什么我们进行16S rDNA测序时,要将扩增产物导入的细菌中,而不直接对纯化后的PCR产物直接测序?
为什么我们进行16S rDNA测序时,要将扩增产物导入的细菌中,而不直接对纯化后的PCR产物直接测序?

为什么我们进行16S rDNA测序时,要将扩增产物导入的细菌中,而不直接对纯化后的PCR产物直接测序?
PCR产物直接测序是用PCR引物进行测序,
而测序两端引物结合位点会有几十个碱基读不出来.
这个是目前技术问题,所有公司的测序仪器都读不出来.
而TA克隆之后就是用载体的通用引物测序,
因为载体的序列是知道的,
所以即使两端有一部分读不清
也没有关系,
这样两个反应就可以测通拼接得到全长序列了.

完全可以直接测序,只不过要设计一些测序引物能保证引物附近的序列能被其它引物测到就行,完全可以不用克隆直接测序的,我一直就这么做的。

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